细胞功能 | 细胞周期结果解读及注意事项

细胞周期（Cell Cycle）指的是连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的完整过程。细胞周期对调控细胞的正常生长与分裂至关重要，深入理解这一过程有助于我们更好地掌握生物的生长发育机制以及肿瘤生长的控制。人生就是博-尊龙凯时将为您介绍细胞周期检测的原理、结果解读及实验注意事项，帮助您更准确地分析细胞周期状态。

1. 细胞周期检测原理

细胞周期可分为两个主要阶段：分裂间期和有丝分裂期。其中，分裂间期可进一步细分为以下几个时期：

• G0期：细胞处于静止或休眠状态，在适宜刺激下可重新进入细胞周期。
• G1期：有丝分裂到DNA复制前的一段时期，细胞主要合成RNA和核糖体，明显增大。
• S期：DNA复制期，合成DNA及组蛋白和DNA复制所需酶。
• G2期：有丝分裂准备期，DNA合成终止，合成大量RNA，包括微管蛋白和促成熟因子。
• M期：细胞分裂。

2. 结果解读及重要参数

• DipG1、DipG2、DipS：分别表示G0/G1期、G2/M期和S期在总细胞中的占比。G0/G1期细胞DNA含量为2N，S期DNA含量为2N-4N，而G2/M期为4N。
• CV：变异系数，反映G0/G1峰的分辨率和准确性。CV值越小，结果质量越好，CV小于5%是理想的，通常小于10%即可接受。
• RCS：反映所选模型与样本的拟合程度，一般在5以下可被接受。
• G2/G1：代表G2/M期细胞与G0/G1期细胞DNA含量的倍数关系，通常在2左右，具体值与染色浓度相关。
• Debris：表示细胞碎片比例，Aggregates：表示粘连体比例，两个比例越低，结果越理想，通常控制在20%以下。

3. 实验注意事项

• 确保上机获取足够多的细胞事件：建议每管细胞数量在50万左右，采集有效细胞数不少于10000。
• 单细胞悬液制备应轻柔，以减少碎片产生，避免影响S期计算。
• 优先使用PBS后加无水乙醇固定，以避免细胞成团。
• RNA去除：使用RNase消除RNA影响，以确保结果准确。
• 排除粘连体，需隔离G2/M期的DNA干扰。
• 使用低速收集细胞，控制CV值保持在较低水平。
• 荧光通道设置为线性放大，确保数据的可靠性。
• 染色后不进行洗涤，以保护荧光强度。
• 定期进行仪器质控，排除机器设置对CV值的影响。

更多资料：细胞周期检测异常实验结果分析。

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