人生就是博-尊龙凯时提供的本试剂盒专为科学研究而设计,严禁用于医学诊断。以下是人黏膜素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒的使用说明。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。操作时,预先包被adropin(AD)抗体的微孔中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。使用底物TMB进行显色反应,TMB在过氧化物酶的催化下生成蓝色,在酸性环境下转化为最终的黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关。最终,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:选择不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后以3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合捣碎,3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:若样本采集后未及时检测,按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融解冻时在室温下确保样品充分均匀解冻。
自备物品及操作注意事项
本试剂盒包含的标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释方法为:将蒸馏水按1:20比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法及步骤
通过绘制标准曲线来判断结果:在Excel表格中以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准品线性回归曲线,根据曲线方程计算各样本的浓度值。
请牢记,人生就是博-尊龙凯时对试剂盒的性能不做任何保证,使用时请严格遵守说明书中的要求。